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引物的化学本质是什么
引物,是指在核苷酸聚合作用起始时,***合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子,与反应物以共价键形式连接,这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。根据其定义和使用功能可以看出,引物的化学本质是DNA或RNA...
发布时间:2026-06-12 浏览量:0
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引物是怎么合成的
1、将预先连接在固相载体上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5羟基的保护基团DMT,获得游离的5羟基。 2、合成DNA的原料,亚磷酰胺保护核苷酸单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3端被活化,5羟基仍然被DMT保护,与溶液中游离的5羟基发生缩合反应。 3、带帽反应,缩合反应中可能有极少数5羟基没有参加反应,用乙酸酐和甲基咪唑终止其后继续发生反应,这种短片段可以在后续环节根据实验需要来选择纯化方式分离掉。 4、在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯...
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